东谈主乙型肝炎病毒名义抗原（HBsAg）ELISA（酶联免疫吸附测定）是一种庸俗诈欺于临床会诊的检测技艺，它通过抗原与抗体的特异性反映来定量或定性检测样本中的HBsAg含量。以下是东谈主乙型肝炎病毒名义抗原ELISA检测操作进程的详备理解：

一、施行准备

1. 试剂盒与试剂准备

ELISA试剂盒每每包含多个构成部分，如包被抗体反映条、酶荟萃物、阳性对照、阴性对照、洗涤液（磷酸盐缓冲液PBS）、显色剂（TMB）A和B等。在施行前，需将所有试剂从冷藏环境中取出，置于室温下均衡约30分钟，以确保试剂达到最好职责温度。同期，凭证施行需要准备蒸馏水，用于稀释浓缩洗涤液。

2. 仪器与竖立

准备酶标仪、移液器（不同量程）、洗板机（或手动洗涤竖立）、恒温箱、飞舞器及磁力搅动器等施行所需竖立，并确保所有仪器处于精粹职责情景。

3. 样本解决

凭证施行条目，解决待测样本（如血清、血浆、细胞培养基等）。血清样本需当然凝固后离心分辩上清；血浆样本需凭证抗凝剂类型羼杂后离心；细胞培养上清液需离心去除颗粒和团员物；组织标本则需切割、匀浆并离心收罗上清。解决后的样本应尽快进行检测，如需保存，应置于-70℃雪柜中，幸免反复冻融。

二、施行要领

1. 包被抗体与加样

ELISA施行的第一步是在微孔板上事前包被抗-HBs（抗乙型肝炎病毒名义抗体），酿成固相抗体。随后，将待测样本加入到包被的微孔板中。每个反映孔中加入的样本量需凭证试剂盒诠释书进行精准截止，每每为0.05ml。同期，树立阳性对照孔、阴性对照孔和空缺对照孔，以便后续效果的判断。

2. 孵育与洗涤

将加入样本的微孔板置于37℃恒温箱中孵育一定时刻（每每为30分钟），使样本中的HBsAg与固相抗体充分荟萃。孵育达成后，使用洗涤液绝对清洗微孔板，以去除未荟萃的物资和杂质。洗涤过程需调换屡次（一般为5次），每次洗涤后需用吸水纸拍干微孔板。

3. 加酶标抗体与再次孵育

向每个反映孔中加入酶标志的特异抗体（酶标抗-HBs），该抗体能与荟萃在微孔板上的HBsAg酿成抗原-抗体夹心结构。再次将微孔板置于37℃恒温箱中孵育一定时刻（每每为30分钟），使酶标抗体与HBsAg充分荟萃。孵育达成后，调换洗涤要领，去除未荟萃的酶标抗体。

4. 显色与断绝

向每个反映孔中轨范加入显色剂A和B，轻轻飞舞混匀后，将微孔板置于37℃恒温箱中避显豁色一定时刻（每每为10-15分钟）。在酶的作用下，底物TMB发生化学反映，生成有色产品，其神志浅深与样本中HBsAg的含量成正比。显色达成后，向每个反映孔中加入断绝液，断绝显色反映，此时溶液神志由蓝色变为黄色。

5. 比色与效果分析

使用酶标仪在450nm波所长测定各孔的吸光度值（OD值）。当先用空缺孔校零点，然后轨范读取各孔的OD值。凭证试剂盒提供的法子弧线或法子品OD值与浓度的对应关连，将样品的OD值代入方程，计较出样品中HBsAg的浓度。每每，样品OD值/阴性对照平均OD值≥2.1判断为阳性，不然为阴性。

三、细隐衷项

1. 试剂保存：试剂盒应置于2℃～8℃保存，幸免阳光直射和高温。使用前需充分摇匀试剂，并幸免不同批号试剂混用。

2. 操作表率：施行过程中应严格遵从操作规程，幸免交叉沾污。加样时应使用一次性吸头，幸免径直斗争断绝液和显色剂。

3. 效果判断：效果判断应在限定时刻内完成（每每为10分钟内），以幸免神志反映随时刻变化而影响效果准确性。

4. 样品解决：样本网络后应尽快进行检测，如需保存应置于-70℃雪柜中，幸免反复冻融。检测前需对样本进行符合解决，如离心去除杂质等。

5. 安全防备：施行过程中应细心个东谈主防备，幸免径直斗争有毒或无益试剂。施行完成后，所有澌灭物应按传染物解决法子进行解决。

通过上述操作进程的详备理解，咱们不错明晰地了解东谈主乙型肝炎病毒名义抗原ELISA检测的全过程。

重磅福利来袭！

优品生物HBsAg ELISA试用装

HBsAg 10ul小规格抗体

可在官网/公众号央求试用